Verhoogde DDAH expressie verstoort de Arginine/NO pathway en stimuleert angiogenese in Hepatocellulair Carcinoom
Buijs, N., Stolz, D.B., Schierbeek, H., Geller, D.A., Houdijk, A.P.J., Leeuwen, P.A.M. van
Locatie(s): NVvH Lounge
Categorie(ën):
Hepatocellulair carcinoom(HCC) is een veelvoorkomende kanker-gerelateerde doodsoorzaak, ondanks verbeteringen van de chirurgische en ablatieve technieken in de laatste decennia. HCC vertoont tekenen van tumor hypoxie en dit is geassocieerd met tumor progressie en een slechte prognose. Stikstofmonoxide(NO) speelt een cruciale rol in angiogenese tijdens de progressieve groei van de tumor om hypoxie tegen te gaan. NO productie is afhankelijk van arginine als substraat en asymmetrisch dimethylarginine(ADMA) als inhibitor voor NO synthase (NOS). De arginine:ADMA ratio is de belangrijkste indicator voor NO productie. ADMA wordt afgebroken door het enzym dimethylarginine dimethylaminohydrolase(DDAH). Hoe deze factoren precies interfereren met tumor hypoxie en angiogenese in HCC is niet eerder onderzocht.
In vitro is de DDAH, NOS en vascular endothelial growth factor (VEGF) expressie gemeten met behulp van immunoblot in een HCC cellijn en hepatocyten. Een hypoxie experiment is uitgevoerd om het effect van hypoxie op de DDAH, NOS en VEGF expressie te onderzoeken.
Voor in vivo experimenten werd een HCC sample, een non-maligne lever sample en serum afgenomen van patiënten die een chirurgische resectie ondergingen van HCC (n=20). Serum van gezonde vrijwilligers werd gebruikt als controle. De expressie van DDAH, NOS en VEGF in HCC en het non-maligne lever weefsel werd gemeten met behulp van immunoblot en immunofluorescentie. NO productie werd bepaald met een Griess assay. Arginine en ADMA concentraties in HCC en non-maligne lever weefsel werden bepaald met massa spectrometrie.
De in vitro experimenten laten een significant hogere DDAH expressie zien in de HCC cellen in vergelijking met hepatocyten. Ook was de NOS en VEGF expressie significant hoger in de maligne cellen. Hypoxie stimuleerde de expressie van DDAH, NOS en VEGF in de HCC cellen.
In vivo is de DDAH expressie ook significant hoger in HCC weefsel in vergelijking met non-maligne lever weefsel. De hogere DDAH expressie is geassocieerd met een hogere arginine:ADMA ratio, een verhoogde NO productie en VEGF expressie.
Deze resultaten laten zien dat de DDAH expressie verhoogd is in HCC, resulterend in een toename van de arginine:ADMA ratio en een verhoogde NO productie. De toename in DDAH expressie wordt gestimuleerd door hypoxie en is geassocieerd met de expressie van angiogenese stimulerende factoren NOS en VEGF.
- Over Buijs, N.
- Over Stolz, D.B.
- Over Schierbeek, H.
- Over Geller, D.A.
- Over Houdijk, A.P.J.
- Over Leeuwen, P.A.M. van